Tā kā proteīna peptīdu zāles galvenokārt ir bioloģiski aktīvas vielas

Tā kā proteīna peptīdu zāles lielākoties ir bioaktīvas vielas un bioloģiskā aktivitāte ir atkarīga ne tikai no zāļu primārās struktūras, bet arī cieši saistīta ar sekundārajām un terciārajām struktūrām, biotests ir unikāla un nepieciešama metode šīs klases farmakokinētikas pētīšanai. Biotestiem ir divi mērķi: tieša zāļu koncentrācijas noteikšana ķermeņa šķidrumos un marķēto zāļu bioloģiskās aktivitātes noteikšana. Tās metodes var iedalīt divās galvenajās kategorijās.
1.1.1. In vivo analīze Parastā peļu asins glikozes noteikšanas metode ar insulīnu utt., papildus dažādām metodēm, kas noteiktas atbilstoši dažādu veidu proteīna polipeptīdu, piemēram, IL-8 mobilizācijas neitrofilu bioloģiskajai aktivitātei, eksperimentos ar trušiem, kas noteikti saskaņā ar atkarībā no IL-8 būtības var mobilizēt lielu skaitu neitrofilu no kaula [1]. Šāda veida metode visintuitīvāk atspoguļo bioloģisko aktivitāti, bet ietver visu dzīvnieku, ir laikietilpīga un darbietilpīga, ar zemu jutību un lielu variāciju.
1.1.2. In vivo audu (šūnu) analīze, piemēram, NGF, stimulē vistas muguras sakņu gangliju augšanu, oksitocīns žurku ex vivo dzemdes metodē utt. Attīstoties molekulārajai bioloģijai, ir izveidotas daudzas specifiskas un jutīgas atkarīgas šūnu līnijas. un šūnu kultūra ir kļuvusi par visizplatītāko metodi. Saskaņā ar dažādiem proteīna peptīdu mijiedarbības ar šūnām mehānismiem ir daudz specifisku darbību. Piemēram, proliferācijas testi, kas ir ātri un jutīgi, bet nedaudz mazāk specifiski; Antiproliferācijas kā ays, noteikšanas sistēma ir vienkārša, jutīga un specifiska; Citopātiskās iedarbības samazināšanas testi [2], kuru pamatā ir zāles ar pretvīrusu aktivitāti, piemēram, interferons, aizsargā šūnas no vīrusu bojājumiem, metode ir intuitīva un jutīga, taču to var traucēt peptīdu apakštipi. Iepriekš minētās metodes ir balstītas uz šūnu skaita palielināšanu un samazināšanu kā kvantitatīviem un efektīviem rādītājiem, un skaitīšanas metodes ietver tiešās skaitīšanas metodi un netiešās skaitīšanas metodi, pēdējā ietver MTT metodi, izotopu (3H, 14C) iekļaušanas metodi u.c. Turklāt ir testi, kuru pamatā ir olu baltuma polipeptīdu netieša mijiedarbība ar šūnām, piemēram, antivielu indukcijas metode kombinācijā ar imūndetekciju [3], enzīmu izraisītas sadalīšanās metode kombinācijā ar enzīmu reakciju [4] un tā tālāk. Kopumā šūnu kultivēšanas metodēm ir tādas priekšrocības kā jutība un specifiskums, objektivitāte un uzticamība, taču arī to trūkumi ir acīmredzami. Pirmkārt, biotesti nevar kvantitatīvi noteikt neaktīvos mazos metabolītus un izsekot to dinamikai in vivo; Otrkārt, paraugi pārsvarā pastāv cilvēka vai dzīvnieka serumā, un endogēno vielu iejaukšanās serumā un iespējamo endogēno faktoru savstarpējā reakcija ietekmē metodes specifiku. Turklāt, lai uzsāktu bioloģiskos procesus, bieži ir nepieciešami sliekšņa citokīni, kas samazina metodes jutīgumu; Ilgstoša atkarīgo celmu šūnu kultūra ir pakļauta mutācijām, kas ietekmē testa specifiku.